Download e-book for kindle: Der Experimentator: Proteinbiochemie Proteomics, 6. Auflage by Hubert Rehm, Thomas Letzel

By Hubert Rehm, Thomas Letzel

ISBN-10: 3827423120

ISBN-13: 9783827423122

ISBN-10: 3827423139

ISBN-13: 9783827423139

Die aktualisierte 6. Auflage dieses Buches gibt einen ?berblick ?ber die Methoden in Proteinbiochemie und Proteomics. Es zeigt Auswege aus experimentellen Sackgassen und weckt ein Gesp?r f?r das richtige scan zur richtigen Zeit. Behandelt werden klassische Verfahren wie S?ulenchromatographie, HPLC, Elektrophoresen, Blots, Elisas, Ligandenbindungstests, die Herstellung von Antik?rpern, das Solubilisieren von Membranproteinen, die examine von Glykoproteinen usw. Einen gro?en Raum nehmen die modernen Verfahren ein: Massenspektrometrie, Proteomics und thermische examine. Neu in der 6. Auflage sind Abschnitte zur Strukturbestimmung und Rekonstitution von Proteinen. Des Weiteren werden neue methods zur Proteinbestimmung, Gelf?rbung, Blottechnik, Phasentrennung von Membranproteinen, Herstellung von Sucrosegradienten und zur Isolierung von Vesikeln vorgestellt. Auch auf 3D-Gele und Methoden zur Quantifizierung von SH-Gruppen wird eingegangen.

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4 CH3CN-Lösung absaugen und Gel in der Vakuum-Zentrifuge trocknen. B. Puffer und Protease zugeben. will, der sollte nur mit Formaldehyd entwickeln und das Gel schnell wieder entfärben. Glücklich scheint damit aber niemand geworden zu sein. Sophie Richert (2004) ist auf die Idee gekommen, das Gel nicht mit Formaldehyd, sondern mit einer Substanz zu entwickeln, die Proteine nicht vernetzt. Das mag nach dem oben gesagten nahe liegend erscheinen, allein, was nahe liegt, wird leicht übersehen: Jedenfalls hat vor Sophie niemand diesen Gedanken verfolgt.

10% BSA in PBS bei 45°C über Nacht (Gershoni & Palade 1982). Literatur 1 2 3 4 Batteiger, B. et al. (1982): The use of Tween 20 as a blocking agent in the immunological detection of proteins transferred to nitrocellulose membranes. J. Immunol. Methods 55, 297–307 Gershoni, J. & Palade, G. (1982): Electrophoretic transfer of proteins from sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gels to a positively charged membrane filter. Anal. Biochem. 124, 396–405 Gültekin, H. & Heermann (1988): The use of polyvinylidendifluorid membranes as a general blotting matrix.

B. der Marker) über das Blocken und weitere Nachweisreaktionen hinaus festhalten will, markiert die Banden auf der Nitrocellulose vor dem Blocken mit Bleistift. Indische Tinte färbt mit etwa der gleichen Empfindlichkeit wie Ponceaurot, doch dauert die Prozedur mehrere Stunden, und die Unterschiede in der Färbeintensität verschiedener Proteine sind groß (Nitrocellulose: Hancock & Tsang 1983; PVDF: Gültekin & Heermann 1988). Kolloidale Goldpartikel färben die Proteinbanden auf Nitrocellulose mit einer Empfindlichkeit, die vergleichbar zur Silberfärbung von Gelen ist.

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Der Experimentator: Proteinbiochemie Proteomics, 6. Auflage by Hubert Rehm, Thomas Letzel


by David
4.5

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